一、手及皮肤黏膜消毒效果监测:

1 、采样时间: 在接触病人和从事医疗活动前进行采样或消毒后立即采样（皮肤粘膜）。

2 、采样面积及方法:

(1) 手的采样:

 棉拭方法：被检人五指并拢，用浸泡有相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在手指屈面从指根到指端往返涂擦2遍，并随之转动棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。

(2) 皮肤黏膜采样：

不规则的皮肤黏膜处可用棉拭子直接采样或用相应面积的规格板采样。

3 、检测方法:

(1) 细菌总数检测。(2) 致病菌检测:大肠、金葡 、铜绿假单胞菌 、溶血性链球菌 、沙门氏菌属。

二、物品和环境表面的监测：

1、采样时间：消毒处理后4小时内进行采样

2．采样面积：被采面积＜100cm² ，取全部表面

被采面积≥100 cm²，取100cm²

3、采样方法：同皮肤黏膜。若是门把手等不规则物体表面(小型物体表面)用棉拭子直接涂擦采样。

三、室内空气消毒效果监测：

1、采样时间： 在消毒处理后、操作前进行采样。

2、采样方法：根据其采样原理分为：平板暴露法、微生物采样器法。

   平板暴露法：

   采样高度：距地面1.5m（80-150cm）

   布点方法：室内面积≤30m²,设内、中、外对角线三点。

             室内面 积>30m²,设4角及中央5点，均距墙壁1m

采样方法：将普通营养琼脂平板或血平板(直径9cm)放在室内各采样点处，采样时将平板盖打开,扣放于平板旁，暴露 5min，盖好立即送检。

检测方法：将采样平板置37 ℃培养48h，计数并鉴定细菌。

采样注意事项：将采样器放在室内各采样点，距地面高度1.0-1.5m左右，离门窗和人员流动1.0m以上，采样人员应远离采样器（最好在待检测的室外）或与采样器保持约50cm的距离，以免将操作者自身散发到环境中的微生物气溶胶粒子采到，影响监测结果。

另外介绍洁净手术室空气采样方法：

（一）、采样方法：

1、当送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测。

2、当送风口分散布置时，按全室统一布点方法检测（按室内面积大小布点）。

3、沉降法采样时，用直径9cm的培养皿,在空气中暴露30min，37℃培养24h，培养皿中的菌落数（cfu）代表空气中沉降下来的细菌数，个/皿。

4、浮游法采样时，用裂隙采样器在空气中随机采样，对采样皿或采样条培养得出的菌落数（cfu），代表空气中浮游下来的细菌数，个/m³。

（二）、采样高度：

1、采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m 的任意高度上。

2、在手术区检测时应无手术台。

3、当手术台已固定时，检测高度应在台面之上0.25m。

（三）、布点方法：

1、 I级洁净手术室：

手术区（100级）5点：双对角线布点

周边区（1000级）8点：每边内2点

2、 Ⅱ- Ⅲ级洁净手术室：

手术区（1000-10000级）3点：单对角线布点

Ⅱ级周边区（10000级）6点：长边内2点，短边内1点

Ⅲ级周边区（100000级）4点：每边内1点

3、 Ⅳ级及送风口分散布置的洁净手术室：

    面积>30m²采取4点：避开送风口正下方

    面积≤30m²采取2点：避开送风口正下方

（四）、采样注意事项：

1、在100级区域检测时，采样口应对着气流方向；在其他区域检测时，采样口均向上。

2、采样后的培养基条或培养皿，应37℃条件下培养24h，并计算菌落数。

3、菌落数的平均值均四舍五入进位到小数点后1位。

4、新房验收时，应最后做空气、物表细菌检测。

四、消毒液的监测:

（一）监测方法:

1、有效成分测定(滴定法)。

2、使用中浓度(试纸法)监测:

①G-1型消毒剂浓度试纸：

注意事项：当溶液有效成份＞1000mg/L或对固体消毒剂检测时，为取得较准确的结果，可稀释至20－500mg/L浓度后，再检测；测试纸应置阴凉、避光、防潮处保存。

②戊二醛浓度测试卡：

注意事项：不要使用过期的戊二醛试纸，不适用含酚戊二醛的测试。

3 、细菌含量监测：

采样时间：采取更换前使用中的消毒剂与无菌器械保存液。

采样量及方法：在无菌条件下，用无菌吸管吸取1mL被检样液，加入9mL含相应中和剂的稀释液(盐水)中混匀，对于醇类与酚类消毒剂，稀释液用普营养肉汤即可。

(二) 质控标准:

使用中消毒液细菌菌落总数应≤100cfu/ml，不得检出致病微生物。

无菌器械保存液必须无菌生长。